原创李倩检验医学网
作者：医院李倩
最近笔者在工作中，看到一份脑脊液标本涂片，视野下满是革兰阳性球菌，向经验丰富同事请教，确定视野中是革兰阳性球菌。
查看病例信息，这是个新生儿脑脊液标本，临床诊断为新生儿低氧血症，同一时期的脑脊液常规提示红色浑浊标本，红细胞/L，白细胞/L，中性粒细胞百分比为%，潘氏试验+++。脑脊液糖含量为0.78mmol/L，脑脊液蛋白3.02g/L。符合化脓性脑膜炎情况。
笔者翻出了患儿的脑脊液标本，可见溶血离心后剩余的脑脊液标本是明显浑浊。
查看患儿医嘱信息时候，发现同时送检了脑脊液培养。好奇翻出了培养的平板，竟然没有菌株生长！！
难道是标本接种错误？
还是涂片玻片污染？
因此笔者再取原管中脑脊液标本和平板上脑脊液标本，涂片染色，结果均证实均存在革兰阳性球菌。考虑可能标本培养时间不够充分，刮取少量原平板上脑脊液标本重新分纯，并用质谱鉴定结果为无乳链球菌。
致电临床报告危急值，告知脑脊液涂片可见革兰阳性球菌，药敏结果还需等待。临床医生表示患儿有相应的化脑性脑膜炎症状，病情危重。
第二天，笔者再查看这份脑脊液培养平板，却发现血平板和巧克力平板均未有明显的菌落生长，反而分纯的血平板上长出了大小的菌落。仔细查看原血平板和巧克力平板上有层薄薄的膜，部分区域较明显，也易误认为为脑脊液本身液体痕迹。
因此笔者把原血平板、巧克力平板上的薄薄的膜，以及重新化板生长的大小菌落均用质谱鉴定，结果均为无乳链球菌，证实这份脑脊液标本含有无乳链球菌。再用分纯血平板生长的菌落上了药敏卡。原血平板和巧克力平板继续培养放置至72小时后，平板上仍未见明显的菌落。
现在再复习一下这个患儿的病例信息。
患儿，男，23天，因“反应差，颜面青紫7小时，带管呼吸7小时”入院。患儿系G2P2，胎龄35+周，因“先兆早产”于年11月8日在外院顺产出生，出生体重2.Kg，生后否认窒息抢救病史，1分钟和5分钟apgar评分均10分。
生后因“早产儿、新生儿低血糖症，新生儿高胆红素症”于11-9至11-17医院儿科住院治疗。出院后患儿母乳和奶粉混合喂养，胃纳消化可，无发热，抽搐，无气促、发绀，无呕吐、腹胀，大小便正常。
12月1日凌晨0时，家属发现患儿反应差，哭声小，拒乳，伴颜面青紫，未予特殊处理。于4:51医院住院治疗，期间予气管插管接呼吸机辅助呼吸、胸外心脏按压、抗感染等对症处理，考虑病情重，遂转至我院进一步治疗。
12月1日患儿转入我院后先予哌拉西林-他唑巴坦抗感染，12月2日考虑患儿病情较重，抗生素升级为美罗培南。并于12月2日行腰椎穿刺。脑脊液涂片、培养结果如上所述。但因患儿病情危重，于12月3日死亡。
无乳链球菌又称B族链球菌，是围生期孕产妇疾病常见的条件致病菌，可通过宫内和产道感染新生儿，新生儿免疫力低，血脑屏障未发育成熟，容易导致败血症、化脓性脑膜炎等重症感染。新生儿脑血管及神经系统发育不成熟，在前囟和颅缝缓冲下，缺乏典型的脑膜刺激征等特异性的临床表现，且病情进展快，可引起严重神经系统并发症和后遗症，甚至死亡。
脑脊液培养是诊断化脓性脑膜炎的金标准，那么为什么这份脑脊液培养，菌落生长不明显？
一方面考虑脑脊液标本中残留抗生素，抑制了平板上菌落生长，而分纯的平板稀释了抗生素作用，长出了菌落。
另一方面，脑脊液标本直接点种，菌液太多而营养不足，细菌未能充分生长。
那么我们平时工作中如何避免再出现这种情况？
体液标本直接接种，可以直观展示体液中菌落情况，培养第二天即可长出菌落，最快三天即可得到鉴定和药敏结果。但也可能出现上述情况。体液标本增菌培养提高了培养的阳性率，但培养瓶报警后再接种平板，需要更晚才能得到结果。而且快生长细菌可能掩盖体液中菌落真实的情况，也增加了操作污染的可能。笔者总结，体液标本送检培养时，可以取部分标本直接接种，剩余的部分增菌培养，两步同时进行，快速而准确提供结果，更好的指导临床治疗。
原标题：《当脑脊液涂片遇到培养结果不符时，该怎么办？》