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TUhjnbcbe - 2021/3/31 7:48:00
北京中科白殿风医院         http://www.bdfyy999.com/
本文作者:医院边泽源熊国亮张周云张齐龙血流感染的实验室诊断是临床微生物室的重要工作之一。因败血症的发生率和死亡率较高,快速和准确地检测出病原菌对于改善病人治疗是非常重要的。医院实验室给大家分享了一个临床微生物工作中,通过使用迈瑞血培养设备及配套树脂培养瓶检出脓肿分枝杆菌的案例。

患者基本情况

患者,女,24岁,1周前无明显诱因出现畏寒、发热,体温38.5℃左右,伴咳嗽、咳*痰、咯血,在当地乡、县医院治疗无效(具体不详),症状逐步加重,1月22日入南大某附院急诊ICU,当晚行气管插管有创通气,予抗感染等治疗,痰培养,血培养5天阴性。因痰中找到抗酸杆菌1月25日转入我院。据其母亲诉:患者半岁至7岁间,平均每年有天均在发热,体温39℃以上,每天均要打退烧针,现智力低下。图:患者检查结果

血培养检出脓肿分枝杆菌

对患者进行血培养细菌学鉴定,在接受抗生素治疗前,发热时,无菌操作取外周静脉血双侧双瓶血标本经TDR-全自动血培养仪培养5天,仪器报警,显示双侧需养瓶均阳。图:迈瑞TDR-全自动血培养仪涂片染色见阳性杆菌,转种哥伦比亚血琼脂和中国兰琼脂培养基。经35℃培养3天,结果血琼脂生长细小灰白色哑光型菌落,类似酵母菌落但无酒香味、突起、大小不一、不溶血、不透明;继续培养后,菌落表面逐渐变干燥粗糙;中国兰生长扁平,明显粗糙小菌落。该菌落用生理盐水涂片时不易乳化,革兰染色阳性杆菌,但易脱色成阴性,抗酸染色绝大部分菌体为阳性杆菌,偶尔可见阴性。着色均匀,与结核分枝杆菌的菌体颗粒感明显不同。菌种鉴定及结核药物敏感试验均按照中国防痨协会基础专业委员会《结核病诊断实验室检验规程》进行。考虑病情危急,该菌的常规生化反应缓慢,增加PCR反相杂交鉴定技术,最终都确认该菌为脓肿分枝杆菌。图:患者报告单同时参考美国临床与实验室标准委员会(CLSI版M24-A2)对快速生长的分枝杆菌体外药敏实验要求,可采用肉汤微量稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)。据《非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识》建议对阿米卡星、头孢西丁以及阿奇霉素等多种抗生素进行常规药敏试验,但在实际临床应用中,对上述药物的药敏试验并未得到推广和应用,原因是相关商品化试剂匮乏。图:迈瑞TDR药敏实验卡为此,我们选用TDR棒状杆菌药敏板进行该菌的药敏试验,结果显示:该分离株对阿米卡星、替加环素、克拉霉素及利奈唑胺的MIC低,有明显的抑菌作用;对头孢菌素、泰能、SMZ等MIC高,显示没有抑菌作用;对一线抗结核药物异烟肼、利福平、乙胺丁醇等均耐药。此结果与张丽娜报道脓肿分枝杆菌对一、二线常用抗结核药物的耐药率均大于95%,异烟肼、对氨基水杨酸、链霉素、卷曲霉素、利福平、左氧氟沙星和乙胺丁醇耐药率为98.9%,利福布汀和丙硫异烟胺耐药率为97.8%一致。

脓肿分枝杆菌具有强致病力

虽然脓肿分枝杆菌感染有报道,但该菌感染后引起菌血症,并通过血培养检测出来,在国际医学文献中却鲜见报道。脓肿分枝杆菌是年由Moore和Frerichs发现但是直到年才从分枝杆菌属中分离出来,属于快速生长的分枝杆菌,是少见的环境致病菌。该菌通过可能污染的土壤或水引起穿透性创伤,肺部尤其是伴有肺囊性纤维化的患者更容易感染,播散病例并不常见,其发生与细胞免疫缺陷有关。脓肿分枝杆菌具有超强的耐药性,对常规抗结核药物耐药,同时也对多种广谱的抗生素治疗都没有效果被称为“抗生素的噩梦”。所以对脓肿分枝杆菌感染的诊治,关键在于实验室发现并确认菌种。

血培养是诊断血流感染的金标准

抗酸染色虽然能发现抗酸杆菌的存在,但不能有效区分结核和非结核分枝杆菌,对脓肿分枝杆菌感染治疗用药帮助甚微,不能解决根本问题,因此培养仍是临床医生诊断该菌感染的金标准。由于血液标本的特殊性,对本文中所述的危重病人,血培养阳性的临床意义极其重要,能为疾病的性质指明方向。同时结合分子生物学方法鉴定分枝杆菌,不但快速,而且准确,也为病人早发现、早诊断、早治疗提供有效的途径,值得临床推荐使用。另外,免疫学查项目T-spot、结核抗体阴性,也为疾病的鉴别给予有力的支持。图:迈瑞TDR培养瓶

经验总结

医院实验室边泽源老师总结到,在工作中遇到疑难病例,若自动血培养仪连续培养5天没有细菌生长,还应该延长培养一段时间,以便发现慢生长的致病细菌;其次,从血培养分离的阳性杆菌,不能轻易认为污染,应该多与临床沟通,避免误判而贻误治疗时机;最后,对血培养物的染色,应该常规加做抗酸染色和瑞士染色,以便尽早发现快速分枝杆菌、奴卡菌、布氏菌等少见病原菌。参考文献:

全国临床检验操作规程第四版.尚红等,:-

中国防痨协会基础专业委员会.结核病诊断实验室检验规程.6.

ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Susceptibilitytestingofmycobacteria,Nocardiae,andotheraerobicactinomycetes.Approved

Standard.M24-A2.Wayne,PA:NCCLS;.

中华医学会结核病学分会.非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识.中华结核和呼吸杂志,,35(8):-.

脓肿分枝杆菌肺病治疗效果及其影响因素分析。张丽娜等。中国实用医药杂志,,15,(2):16-18.

MOOREM,FRERICHS,JB.Anunusualacid-fastinfectionofthekneewithsubcutaneous,abscess-likelesionsoftheglutealregion;reportofacasewithastudyoftheorganism,Mycobacteriumabscessus,n.sp.JInvestDermato1.,20(2):—69.

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