患者基本情况
患者,女,24岁,1周前无明显诱因出现畏寒、发热,体温38.5℃左右,伴咳嗽、咳*痰、咯血,在当地乡、县医院治疗无效(具体不详),症状逐步加重,1月22日入南大某附院急诊ICU,当晚行气管插管有创通气,予抗感染等治疗,痰培养,血培养5天阴性。因痰中找到抗酸杆菌1月25日转入我院。据其母亲诉:患者半岁至7岁间,平均每年有天均在发热,体温39℃以上,每天均要打退烧针,现智力低下。图:患者检查结果血培养检出脓肿分枝杆菌
对患者进行血培养细菌学鉴定,在接受抗生素治疗前,发热时,无菌操作取外周静脉血双侧双瓶血标本经TDR-全自动血培养仪培养5天,仪器报警,显示双侧需养瓶均阳。图:迈瑞TDR-全自动血培养仪涂片染色见阳性杆菌,转种哥伦比亚血琼脂和中国兰琼脂培养基。经35℃培养3天,结果血琼脂生长细小灰白色哑光型菌落,类似酵母菌落但无酒香味、突起、大小不一、不溶血、不透明;继续培养后,菌落表面逐渐变干燥粗糙;中国兰生长扁平,明显粗糙小菌落。该菌落用生理盐水涂片时不易乳化,革兰染色阳性杆菌,但易脱色成阴性,抗酸染色绝大部分菌体为阳性杆菌,偶尔可见阴性。着色均匀,与结核分枝杆菌的菌体颗粒感明显不同。菌种鉴定及结核药物敏感试验均按照中国防痨协会基础专业委员会《结核病诊断实验室检验规程》进行。考虑病情危急,该菌的常规生化反应缓慢,增加PCR反相杂交鉴定技术,最终都确认该菌为脓肿分枝杆菌。图:患者报告单同时参考美国临床与实验室标准委员会(CLSI版M24-A2)对快速生长的分枝杆菌体外药敏实验要求,可采用肉汤微量稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)。据《非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识》建议对阿米卡星、头孢西丁以及阿奇霉素等多种抗生素进行常规药敏试验,但在实际临床应用中,对上述药物的药敏试验并未得到推广和应用,原因是相关商品化试剂匮乏。图:迈瑞TDR药敏实验卡为此,我们选用TDR棒状杆菌药敏板进行该菌的药敏试验,结果显示:该分离株对阿米卡星、替加环素、克拉霉素及利奈唑胺的MIC低,有明显的抑菌作用;对头孢菌素、泰能、SMZ等MIC高,显示没有抑菌作用;对一线抗结核药物异烟肼、利福平、乙胺丁醇等均耐药。此结果与张丽娜报道脓肿分枝杆菌对一、二线常用抗结核药物的耐药率均大于95%,异烟肼、对氨基水杨酸、链霉素、卷曲霉素、利福平、左氧氟沙星和乙胺丁醇耐药率为98.9%,利福布汀和丙硫异烟胺耐药率为97.8%一致。脓肿分枝杆菌具有强致病力
虽然脓肿分枝杆菌感染有报道,但该菌感染后引起菌血症,并通过血培养检测出来,在国际医学文献中却鲜见报道。脓肿分枝杆菌是年由Moore和Frerichs发现但是直到年才从分枝杆菌属中分离出来,属于快速生长的分枝杆菌,是少见的环境致病菌。该菌通过可能污染的土壤或水引起穿透性创伤,肺部尤其是伴有肺囊性纤维化的患者更容易感染,播散病例并不常见,其发生与细胞免疫缺陷有关。脓肿分枝杆菌具有超强的耐药性,对常规抗结核药物耐药,同时也对多种广谱的抗生素治疗都没有效果被称为“抗生素的噩梦”。所以对脓肿分枝杆菌感染的诊治,关键在于实验室发现并确认菌种。血培养是诊断血流感染的金标准
抗酸染色虽然能发现抗酸杆菌的存在,但不能有效区分结核和非结核分枝杆菌,对脓肿分枝杆菌感染治疗用药帮助甚微,不能解决根本问题,因此培养仍是临床医生诊断该菌感染的金标准。由于血液标本的特殊性,对本文中所述的危重病人,血培养阳性的临床意义极其重要,能为疾病的性质指明方向。同时结合分子生物学方法鉴定分枝杆菌,不但快速,而且准确,也为病人早发现、早诊断、早治疗提供有效的途径,值得临床推荐使用。另外,免疫学查项目T-spot、结核抗体阴性,也为疾病的鉴别给予有力的支持。图:迈瑞TDR培养瓶经验总结
医院实验室边泽源老师总结到,在工作中遇到疑难病例,若自动血培养仪连续培养5天没有细菌生长,还应该延长培养一段时间,以便发现慢生长的致病细菌;其次,从血培养分离的阳性杆菌,不能轻易认为污染,应该多与临床沟通,避免误判而贻误治疗时机;最后,对血培养物的染色,应该常规加做抗酸染色和瑞士染色,以便尽早发现快速分枝杆菌、奴卡菌、布氏菌等少见病原菌。参考文献:全国临床检验操作规程第四版.尚红等,:-
中国防痨协会基础专业委员会.结核病诊断实验室检验规程.6.
ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Susceptibilitytestingofmycobacteria,Nocardiae,andotheraerobicactinomycetes.Approved
Standard.M24-A2.Wayne,PA:NCCLS;.
中华医学会结核病学分会.非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识.中华结核和呼吸杂志,,35(8):-.
脓肿分枝杆菌肺病治疗效果及其影响因素分析。张丽娜等。中国实用医药杂志,,15,(2):16-18.
MOOREM,FRERICHS,JB.Anunusualacid-fastinfectionofthekneewithsubcutaneous,abscess-likelesionsoftheglutealregion;reportofacasewithastudyoftheorganism,Mycobacteriumabscessus,n.sp.JInvestDermato1.,20(2):—69.
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