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转虎皮鹦鹉沙门氏菌的诊断部分病情图 [复制链接]

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沙门氏菌病是由沙门氏菌引起的以败血症、肠炎为主的疾病。由于可以感染人、多种家畜以及野生动物,在公共卫生学上具有重要的研究地位。年6月,我院接收一例虎皮鹦鹉突然拉血便死亡的病例,通过沙门氏菌PCR快速鉴定为沙门氏菌感染。

死亡鹦鹉解剖前

死亡鹦鹉解剖前


  1发病死亡过程


  宠主来院要求鉴定该鹦鹉死亡原因,描述该虎皮鹦鹉突然死亡,肉眼观察该鹦鹉仅肛门处有大量血便。解剖观察,肝脏质地脆、有片状黄色坏死灶;胰腺轻微出血;肾脏较脆;十二指肠后端及盲肠出血严重;其余脏器正常。寄生虫检查排除球虫。

大量血便


  2细菌分离


  无菌采集病死鹦鹉的肝、脾等组织接种于血平皿,37℃培养18~24h后观察。从肝脏中分离出溶血小菌落,接种至麦康凯平皿上长出无色透明菌落,接种至亚硫酸铋平板上长处带金属光泽的黑色菌落。经革兰氏染色,该菌为阴性杆菌,初步判断为沙门氏菌。

病死印务剖检图


  3PCR鉴定


  3.1细菌DNA摄取


  细菌DNA提取采用热裂解法,即将各取μl检测菌液、沙门氏菌标准株菌液和水(阴性对照)于离心管中,℃煮沸10min后,r/min离心10min,取上清液为DNA模板。


  3.2PCR反应


  检测沙门氏菌的特异性PCR引物为P1:5‘-ACTGGCGTTATCCCTTTCTCTGGTG-3’,P2:5‘-ATGTTGTCCTGCCCCTGGTAAGAGA-3’。


  3.3电泳分析


  取5μlPCR产物直接经1%琼脂凝胶(含0.5μg/ml溴化乙锭)电泳,在凝胶成像仪中观察结果并拍照。检测菌样出现沙门氏菌特异性条带为bp,表面该菌为沙门氏菌。

电泳分析结果


  4药敏试验


  以为K-B法进行药物敏感试验。该菌接种于血平板,贴上药敏纸片,37℃培养24h,观察结果。本菌对庆大、丁胺卡那、氟苯尼考、诺氟沙星敏感。对先锋霉素、青霉素G钠、头孢曲松、氟哌酸、痢特灵、阿莫西林等耐药。


  5鹦鹉沙门氏菌的防治


  5.1鹦鹉沙门氏菌病的治疗


  OP诺氟沙星每,10-20毫克/千克体重,分3次口服。


  链霉素,每日到毫克/千克体重,分2-3次口服。


  5.2鹦鹉沙门氏菌病的预防


  (1)带菌鸟和健康鸟隔离饲养。一定不能用康复鸟做种鸟。


  (2)鸟笼鸟舍鸟窝要经常消毒。可用0。1%的过氧乙酸喷雾消毒,也可用5%漂白粉或84消毒液或5%的火碱对鸟笼周围环境消毒。


  (3)雏鸟开食后预防用药,用呋喃唑酮每日10毫克/千克体重,分3-4次口服,连用3天,连续使用不得超过五天,以免发生中毒。


  6讨论


  6.1国内有报到沙门氏菌感染各种珍稀珍禽,并引起较大经济损失。本次鹦鹉死亡迅速,临床仅仅出现血便,而从肝脏分离出沙门氏菌,说明该菌已造成全身败血症、严重的肠炎,符合该病临床症状。


  6.2感染沙门氏菌的症状为:幼鸟嗜睡,食欲消失,胎毛蓬乱,喜躲在昏暗处,缩颈,眼半闭,翅膀下垂,呆立不动,腹泻。粪便初呈乳糜样,以后变为白色,肛门周围胎毛常沾有粪便,有时见肛门被粪便堵住,肛门沾满粪便的病雏鸟在排便时常发出尖锐呜叫声。此外常常体温升高,呼吸困难,大多数死亡。此外,依禽种的不同,也有较典型的病症。如灰鹦容易有关节炎,肉芽肿皮肤炎,蜂窝织炎,腱鞘炎等慢性病变。吸蜜鹦鹉则有较高的死亡率。小鹦鹉、金丝雀(详情介绍)易有眼睛症状。


  在传统的沙门氏菌鉴定方法中,常规鉴别培养基分离和生化鉴定程序复杂、时间较长;全自动细菌鉴定仪鉴定成本较高、操作复杂;沙门氏菌A~F多价0抗原检测会因该菌发生S-T-R变异,丧失了正常的0抗原,而不能被血清凝集或出现自凝现象,造成假阴性。本次采用PCR方法对沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列进行扩增,具有特异、快速、简便、灵敏等的优点。因为检测细菌的核酸,所以该方法有着准确性较高的优点。虽然该方法在家畜、家禽等临床上已经广泛应用,但这是首次运用在鹦鹉沙门氏菌病的检测中。


  目前沙门氏菌的耐药性引起了极大的
  沙门氏菌广泛存在于自然卷中,尤其在污水、土壤、感染动物的排泄物中。无锡的6、7月正值梅雨季节,加之宠主刚从外地买入该鹦鹉不久,其免疫力有所下降。因此快速分离鉴定细菌,同时结合药敏实验结果,合理的预防性用药,及时进行笼舍消毒,是避免鸟类发病的关键。

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