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第八部分
微生物学和微生物检验之二
病原性球菌及检验
葡萄球菌属
球形、排列成葡萄串状的G+球菌，无鞭毛和芽孢，有些形成荚膜。需氧或兼性厌氧，营养要求不高，多为菌株耐盐性。
按凝固酶的产生分两大类
根据不同色素分为金*色、白色、柠檬色葡萄球菌（脂溶性色素）
金*葡萄球菌在血平板上有透明溶血环（溶β血）
葡萄球菌蛋白（SPA）存在葡萄球菌表面具有抗吞噬作用，可以人类IgG的FC段非特异结合，展开协同凝集实验
触酶试验阳性，致病菌株可分解甘露醇~产生血浆凝固酶
葡萄球菌是抵抗力最强的无芽胞菌
致病性：
侵袭性疾病：皮肤、软组织感染：（痈继发败血症）；
全身性感染：败血症、脓*血症、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎
呼吸道感染：支气管肺炎、肺炎等
医院内感染
*性疾病：食物中*、烫伤样皮肤综合症、中*性休克、葡萄球菌型肠炎
微生物检查：常规标本格兰染色镜检初步报告；粪便、呕吐物接种于高盐卵*或高盐甘露醇平板；金*色葡萄球菌可溶血、血浆凝固酶、甘露醇发酵、耐热核酸试验阳性
凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性重要指标；
凝固酶阴性葡萄球菌鉴别采用新生霉素敏感试验：表皮葡萄球菌敏感
腐生葡萄球菌耐药
可用幼猫检测肠*素
链球菌
根据溶血现象：甲型（a）溶血性链球菌（又称草绿色链球菌）
乙型（β）（又称溶血性链球菌）
丙型（γ）链球菌（又称不溶血性链球菌）
对人致病性最强为A群链球菌（化脓性链球菌),其多数呈现乙型溶血，致病力最强为乙型溶血链球菌
链球菌呈链状排列的G+球菌、无鞭毛芽孢、多数兼性厌氧（少数专性厌氧）、营养要求高（须加入血液或血清）、在培养基中沉淀生长
生化反应：触媒试验阴性、能分解葡萄糖、产酸不产气。
链球菌属与葡萄球菌属的主要鉴别试验是~触酶试验
致病性：A群、B群、肺炎链球菌是3种重要致病菌
猩红热~多由A群链球菌引起
链球菌感染后的变态反应疾病~风湿热、肾小球肾炎。
B群链球菌~新生儿肺炎、脑膜炎、败血症的病原体
草绿色链球菌为条件致病菌，常与亚急性心内膜炎有关
D群链球菌引起呼吸道和泌尿道感染
微生物检验：直接格兰染色初步报告、5~10%CO2环境生长良好。
A群链球菌杆菌肽试验阳性
B群链球菌CAMP试验阳性、可水解马尿酸钠
D群链球菌七叶苷试验阳性
肺炎链球菌
G+球菌、呈矛尖状成双排列、有荚膜、无鞭毛芽孢、需氧或兼性厌氧、营养要求高、
血平板上形成：灰色扁平、中间凹陷的菌落，周围伴有草绿色溶血环。
液体培养基可产生自溶
生化反应：胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性、菊糖发酵试验阳性（与甲型溶血链球菌相鉴别）
5~10%CO2环境下生长良好，荚膜肿胀试验和快速溶胶凝集试验阳性；小白鼠试验阳性
致病：大叶性肺炎、支气管炎、败血症等
肠球菌属~归链球菌
归链球菌科、临床主要分粪肠球菌、尿肠球菌。
呈单个、成对或短链状排列的G+球菌、需氧或兼性厌氧、营养要求高
高盐（6.5%NACI）、高碱（PH9.6）、40%胆汁培养基（分解七叶苷）生长、表现固有耐药
检查：胆汁七叶苷和6.5%NACI耐受试验可鉴定到属
致病：多为尿路感染（医院感染）、严重者败血症、腹腔感染
奈瑟菌属
G—双球菌、球形或肾形成对排列、无芽孢鞭毛、有菌毛、专性需氧、氧化酶阳性。
对人致病的：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌。
常位于中性粒细胞内（慢淋时位于细胞外）、能产生自溶酶、
营养要求高：巧克力琼脂、血液琼脂、卵*双抗琼脂。
专性需氧，5~10%CO2促进生长（淋球菌初次分离必须）、触酶和氧化酶试验阳性、抵抗力弱
检查：立即送检或预温平板、格兰染色镜检发现中性粒细胞内G-双球菌可初步诊断
脑膜炎奈瑟菌：氧化酶和触酶阳性；分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气；荚膜多糖抗原
直接凝集试验和快速乳胶凝集试验阳性、唯一宿主是人。
淋球菌：氧化酶阳性；仅分解葡萄糖产酸；核酸检测技术可快速诊断。
（仅发酵葡萄糖，而不发酵麦芽糖，可与脑膜炎奈瑟菌相区别）
致病：脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎病原菌、定植部位为鼻咽部、借口气传播
淋病奈瑟菌是性传播疾病淋病的病原菌（婴儿出生可致淋菌性结膜炎）、菌毛是致病因素
卡他布兰汉菌
G—双球菌、无芽孢鞭毛、需氧、不易于脑膜炎奈瑟菌鉴别、营养要求不高（普通培养基18~20℃生长与脑膜炎奈瑟菌区别）
检查：氧化酶、触酶阳性；产DNA酶；多数还原硝酸盐与亚硝酸盐（与奈瑟菌属鉴别）
致病：中耳炎、鼻窦炎、肺炎
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肠杆菌科及检验（共性：氧化酶阴性、硝酸盐还原阳性、发酵葡萄糖）
概述
广泛分布水和土壤中，寄居于人体和动物肠道内，多为正常菌群（除沙门菌属、志贺菌属、埃希菌属部分菌种、耶尔森菌属常引起腹泻和肠道感染外，其余均为条件致病菌）
肠杆菌是生化学性状相似的G—杆菌、有20个菌属
菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原是肠杆菌血清学分群和分型的依据，表面抗原可阻断O抗原与相应抗体的反应、加热处理能破坏阻断。抵抗力不强、耐受低温和胆盐
致病性：细菌性痢疾~志贺菌引起、伤害副伤寒~沙门菌引起
选择性培养基的选择多取决于标本类型，多数细菌的形态和染色体无鉴别意义。
初步鉴定：确定肠杆菌科细菌：氧化酶试验、葡萄糖氧化-发酵试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别（氧化酶试验区分杆菌科和弧菌科细菌，前者阴性后者阳性）
分群：采用苯丙氨酸脱氨酶、葡萄糖酸盐试验
生化反应：属种初步鉴定肠道致病菌与非致病菌常用试验是乳糖发酵试验（前者—,后者+）
最后鉴定：吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（INViC）为鉴别肠道杆菌重要生化反应
埃希菌属
G—短杆菌、兼性厌氧、营养要求不高、有鞭毛、菌毛、荚膜。
依红亚甲蓝（EMB、弱选择培养基）~发酵乳糖、菌落有金属光泽并呈蓝紫色
麦康凯（弱选择）和SS（强选择）中的胆盐都其抑制、耐受菌株形成粉红色菌落
生化反应：氧化酶阴性、硝酸盐还原阳性、发酵多种糖产酸产气、H2S阴性埃希菌
MIU：（++-）
IMViC：（++——）乳糖+
血清型按O:K：H排列（K为表面抗原）
致病性：肠道感染：肠产*性（ETEC）~旅游和婴儿腹泻
肠致病性（EPEC）~主要婴儿腹泻
肠侵袭性（EIEC）~痢疾样腹泻（粘液脓血便）
肠出血性（EHEC）~血清O：H7，出血性结肠炎、溶血性尿*症
肠道外感染：以泌尿系统感染为主
检验：EIEC与志贺菌相似（与一般大肠埃希菌不同特征：动力阴性、赖氨酸脱羧酶阴性、不发酵或迟发酵乳糖），鉴别试验是醋酸钠、葡萄糖铵利用和粘质酸盐产酸试验（大肠埃希菌均为阳性，志贺菌全阴）
志贺菌属
G—短小杆菌、无鞭毛、有菌毛、需氧或兼性厌氧、营养要求不高、无动力、H2S阴性
宋氏志贺菌形成扁平、粗糙菌落
双糖铁培养基（KIA）可初步将志贺菌从肠杆菌中鉴别出来：斜面产碱、底部产酸，
宋内志贺菌是个别菌株迟缓发酵乳糖，H2S阴性；MIU为—+—；IMViC为++----
按抗原构造分：痢疾（A)、福氏（B）、鲍氏（C）、宋内（D）4群
致病性：是人类细菌性痢疾常见病原菌，以福氏、宋内多见
检验：接种于SS和麦康凯平板
鉴别：志贺菌属与伤寒沙门鉴别：动力试验、H2S试验、沙门菌因子（志贺均为阴性）
与类志贺菌鉴别：动力试验、氧化酶试验(志贺菌为阴性、后者为阳性)
沙门菌属
G—直杆菌、有鞭毛菌毛、兼性厌氧、营养要求不高、H2S阳性
生化反应：KIA培养基斜面产碱、底层产酸、产气或不产气、H2S多阳性
MIU为+——
IMViC为—+—+
伤寒与副伤寒鉴别：前者赖氨酸脱羧酶阳性、鸟氨酸脱羧酶阴性，后者相反
O抗原是沙门分群依据、H抗原是分型依据、Vi抗原类似大肠杆菌K抗原的表面抗原发生V~W变异，其属于*力变异
致病性：侵袭力、内*素、肠*素：伤害与副伤寒（肠热症）~由其内*素引起慢性发热
检验：疑为沙门菌感染于第1、2周取血，2、3周取粪便，第三周取尿液，全程取骨髓
血清学诊断（肥大试验）：伤寒沙门菌O凝集效价》1：80；H效价》1:；
副伤寒H效价》1
0或恢复期比初次效价》4倍有意义
恢复期效价最高）
变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属
G—杆菌、两端钝圆、营养要求不高、生长温度10~43℃
普通变形杆菌、奇异变形杆菌呈迁徙扩散生长；H2S、明胶液化变形均阳性，后2者全阴性
共同特点：氧化酶阴性、苯丙氨酸光氨酶阳性
外斐试验：普通变形杆菌OX19、OX2、OXk抗原与立克次体有共同抗原
致病性：变形杆菌为肠道寄宿正常菌群，医源性感染的重要条件致病菌
普通变形杆菌~食物中*
奇异变形杆菌~婴幼儿肠炎
潘氏~医院感染
三菌属鉴别：变形杆菌迁徙生长，H2S、明胶液化阳性；后者均阴性。
普罗威登斯菌属鸟氨酸脱羧酶阴性、枸橼酸盐利用阳性，后者反之。
变形杆菌种鉴定：普通变形~靛基质、麦芽糖均阳性，鸟氨酸脱羧酶阴性；
奇异变形~阴性，阳性；
产黏变形~麦芽糖阳性，其余阴性
耶尔森菌属
G—、两端钝圆、最适宜温度28~30℃，肉汤呈钟乳石状发育
KIA结构分解葡萄糖、不利用乳糖，不产H2S、MIU均阴性
肠杆菌科的其他菌属
克雷伯菌属
G—球杆状、成双排列、有荚膜、无鞭毛芽孢
特点：动力试验、鸟氨酸脱羧酶阴性
肺炎克雷伯菌吲哚阴性、在10℃不能生长
克雷伯菌属对氨苄西林天然耐药
肠杆菌属
G—短而粗杆菌、有周鞭毛、营养要求不高（普通培养基可生长）
生化反应特点：氧化酶阴性
鉴别：与大肠埃希菌鉴别用IMViC：肠杆菌属为——++
大肠埃希菌++——
与肺炎克雷伯菌鉴别用动力试验：肠杆菌阳性，肺炎克雷伯阴性
沙雷菌属
G—细小杆菌、有周鞭毛，在4%NACI条件下可生长
利用枸橼盐酸、丙氨酸为唯一碳源
沙雷菌与其他菌属细菌的区别是：沙雷菌DNA酶和葡萄糖酸盐阳性；对多粘菌素和头孢菌素天然耐药。
弧菌科及检验
G—直或微弯杆菌、分布子在自然界中，以水最多见，发光杆菌对人无致病性
共同特点：氧化酶阳性、具有极端鞭毛（动力试验阳性）、发酵葡萄糖
根据极端鞭毛、甘露醇、酯酶、NACI、O/将4个菌属鉴别：
弧菌属为+++++
气单胞菌属为——++—
邻单胞菌属为————+
发光菌属为——+/－++
说明：资料整理自网络，可能知识点存在遗漏或不正确，请以教材为准
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